細胞外小胞体（エクソソーム）のサイズ・個数濃度測定

細胞外小胞体、エクソソームとは

細胞外小胞体（EVs：Extracellular Vesicles）とは、細胞が分泌する　おおよそ50nm～1,000nmサイズの粒子で、タンパク質、mRNA、miRNAなどが内包されている物質です。特に50-150nmサイズの粒子は一般的にエクソソームと呼ばれており、1980年代に発見されて以降、今日に至るまでバイオマーカとしての研究が続けられています。近年では間葉系幹細胞由来のエクソソームを用いた新療法の研究、エクソソームを送達キャリアとしてDDS（薬物送達／ドラッグデリバリーシステム）の研究など、再生医療分野での研究が進められています。また、エクソソームを用いた美容、健康関連商材の販売も活発化しています。

参考文献
１．東京都健康長寿医療センター研究所　「エクソソームは細胞からのメッセージ！？」
　　https://www.tmghig.jp/research/topics/201704-3381/

２．国立がん研究センター研究所　分子細胞治療研究分野　勝田　毅・落谷孝広　「新規治療薬開発への間葉系幹細胞由来エクソソームの応用可能性」
　　https://www.jstage.jst.go.jp/article/dds/29/2/29_140/_pdf

３．東京医科大学「骨髄異形成症候群由来エクソソームによる骨髄微小環境を介した造血不全の新規メカニズムの解明〜エクソソームの制御を基盤とした新規治療法の可能性〜」
　　https://www.tokyo-med.ac.jp/news/2022/0524_150000002975.html

４．大阪大学大学院医学系研究科・医学部　「大阪大学と再生医療関連事業のセルソース、エクソソーム治療の確立に向け共同研究契約を締結」
　　https://www.med.osaka-u.ac.jp/archives/18876

エクソソームの特性評価

現在、エクソソームの特性評価には以下のような代表的手法が用いられています。

手法	粒子サイズ	個数カウント	目的タンパクの検出

ナノ粒子トラッキング解析（NTA法）	可能	可能	可能
ELISA法	-	-	可能

ウエスタンブロッティング法	-	-	可能

フローサイトメトリー法	可能（一部サイズの制限あり）	可能	可能

エクソソーム解析前の準備

上記の主な解析手法を実施する際には、血清・血漿などの元となる体液の精製を行い、エクソソームを取り出す必要があります。

代表的な精製手法は以下となります。

　・超遠心法

　・ポリマー沈殿法

　・クロマトグラフィー法

　・免疫沈降法

NanoSightでは、NTA法を用いて、精製済みエクソソームの粒径・個数分布の測定はもちろん、特定の膜表面タンパク質を持っているエクソソームへ蛍光標識を行い、その粒径・個数濃度を高分解能で簡便な手順にて測定することが可能です。

ナノ粒子解析システム NanoSight（ナノサイト）

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NanoSight 細胞外小胞体（エクソソーム）アプリケーションノート

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